应用 ‖ 使用瑞士步琦快速纯化及制备HPLC系统分离柠檬香茅精油中的柠檬醛同分异构体

柠檬草因富含柠檬油被世界各地广泛种植，主要应用于维生素A、杀虫喷雾剂、香水、化妆品、食品及饮料等领域。同时柠檬香草茶也很受欢迎。柠檬香茅油中含有很多单萜类物质，其中65-85%为柠檬醛。柠檬醛（3,7-二甲基-2,6-辛二烯醛）为无环单萜类化合物，含有香叶醛（反式-，柠檬醛A）和橙花醛（顺式-，柠檬醛B）两种同分异构体。另外柠檬香茅油中还含有香叶醇、乙酸香叶酯、单萜烯（例如月桂烯）等其他化合物[1]。

本应用文章的最终目的是分离柠檬香茅油中香叶醛（geranial）和橙花醛（neral）两个同分异构体（图1）。实验第一步先利用正相flash分离柱进行粗分离，再使用旋转蒸发仪R-300将粗分离的组分浓缩至5mL。第二步使用制备色谱柱及Prep高压模式分离两种同分异构体。本实验在Reveleris® Prep纯化系统上使用flash和Prep两种分离模式，具体仪器参数见表1。

图 1: 两种同分异构体结构式

表 1: flash和Prep制备模式的色谱条件

图 2: Reveleris® Prep 纯化系统

图3：柠檬香茅精油flash分离模式的色谱图

图3为flash模式分离的色谱图。柠檬醛组分在4-7分钟时出峰。从蒸发光的检测信号（绿色）可以看到，色谱峰有分叉的情况，这个情况的出现表明可以通过进一步实验分离两种同分异构体。

图4：Prep制备模式时分离两种同分异构体的色谱图

图4为Prep制备模式时分离两种同分异构体的色谱图。在此条件下，两种同分异构体香叶醛和橙花醛在27min时达到峰分离。这是因为应用了比flash柱粒径更小的制备型色谱柱，才能够获得更高性能、更高效的分离和纯化结果。

Reveleris® Prep纯化系统具备两种分离模式（flash快速模式及Prep高压制备模式），本应用先用Reveleris® flash从天然柠檬香茅精油中分离柠檬醛混合物。然后同机转换到Prep高压制备模式将两个同分异构体分离，最终分别得到香叶醛和橙花醛纯品。

[1] Govindarajan, V.S.; Sathyanarayana, M.N.; Capsicum. Production, technology, chemistry, and quality. Part V. Impact on physiology, pharmacology, nutrition, and metabolism; structure, pungency, pain, and desensitization sequences. Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 29, p. 435-475, 1991.